LPS細胞実験

マイクログリアにおけるアミロイドβ排除能の促進

アルツハイマー病では、脳内にアミロイドβという物質が増えていることが報告されています。アミロイドβとは、脳内にしみのようにできてくる繊維状の不溶性物質で、老化にともなってある程度できてくるものです。従って、アルツハイマー病の原因または悪化因子であるか、単に老化の結果であるかについては明確な答えは出ていません。ただアミロイドβの中で、神経細胞を犯す作用のあるタイプがあることはわかっています（*1）。

アミロイドβの脳への沈着は、認知症が表れる数年前、早い人では４０歳代から始まると言われていますが、通常は、脳内のマイクログリア（脳のマクロファージ細胞）が取り除いています。そこで、ここでは、マイクログリアによるアミロイドβの貪食能が、LPSｐ（パントケア・アグロメランス由来LPS）による刺激で高まるかどうかを確認しました。

C8-B4細胞（マウスマイクログリア細胞株）を、24穴プレートに2.5×105 cells/ウエルの割合でまき、さらにLPSpを添加しました（最終溶液量：1ml、LPSpの最終濃度：10ng/ml）。37℃、5%CO2環境下で18時間前培養した後に、培養液を、蛍光ラベルしたアミロイドβ（Hilyte Fluor488アミロイドβ、終濃度1μg/mL）を含有する培養液に置換し3時間培養しました。培養後、C8-B4細胞を回収・洗浄し0.5mlの1%BSA/PBS(-)溶液に再懸濁し、フローサイトメーターにより、蛍光アミロイドβを貪食しているマイクログリアの数を測定しました。その結果、LPSｐで予め刺激したマイクログリアでは、刺激しないマイクログリアに比較し、アミロイドβの貪食率が統計的有意差をもって高いことが示されました。

（*1）アルツハイマー病様神経毒性におけるアミロイドβコンホマーの役割, 基礎老化研究 39（3）; 29－34 (2015)

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